近日,河南雲幫農業(yè)了解到一種白芨多糖膠精制工藝。下(xià)面,就來與大家分討照享一下(xià)吧!
技術(shù)領域
該發明屬于天然植物多糖膠深加工技術(冷司shù)領域,涉及一種白芨多糖膠精制工藝,特别是涉及白們內芨多糖膠生物酶法精制和(hé)溶劑處理相結合的術日精制純化工藝。
背景技術(shù)
白芨[Blettila striata(Thunb.)Rei地司chb.f.]蘭科白芨屬植物,又稱小白芨、蓮及草、雪(你間xuě)如(rú)末等,是藥食兩用傳統中分家(zhōng)藥資(zī)源,千百年來一直作為身見傳統中(zhōng)藥使用,其主要功能是斂瘡止血、補肺、消筆吧腫生肌等。白芨鱗莖中(zhōng)大量水溶液性拍拿多糖,其化學成分是葡萄甘露聚糖,是白芨膠(或稱白芨多糖膠)的主要功能性草謝成分。其地下(xià)鱗莖含有30%以上的葡甘聚糖,其甘露糖和(hé)葡萄糖兩海鄉種糖基的比例大約為4:1,平均分子(zǐ器我)量在280萬,白芨多糖膠是一種優良的天然增稠劑,是安全性在時較高的醫藥原料、性能卓越的藥用輔料和(hé)有相當發展唱書前景的生物醫學材料。此外,白芨多糖膠還可(kě)應用于日化産品中電了(zhōng),替代化學增稠劑,并具有減少(shǎo)刺激性、保護皮膚、延緩衰間時老等功能。白芨多糖的提取和(hé)精制工藝主要有水提法,乙醇一水提法長老,連續逆流提取法,這些方法提取所得産品得率一般不高,如城且産品的純度較低,粗白芨多糖純度一般低于80%,色澤略黃,且帶有藥味鐘明,作為食品添加劑或醫藥材料還需要進行精制。大大學廠限制了白芨多糖膠在食品和(hé)醫藥上的應用。
白芨作為我國的特有藥食兩用植物資(zī)源,靜金研究條件得天獨厚,但迄今為止,國内有關(gu友少ān)白芨多糖純化精制的文(wén)獻不請裡是很多,更值得一提的是,尚沒有對白芨多糖中(zhōng)非糖類雜質的算分系統研究報道,國外對于白芨多糖膠的研究可(kě)謂鳳毛麟水東角,幾乎沒有涉足者。雖然文(wén)獻報道和森些(hé)相關(guān)研究不甚豐富,對于白芨葡甘聚糖純化帶來了極大的一知不便和(hé)困難,同時也為研究白芨純化技術(shù)的必要性提供了契機。樂就在實踐上,有人采用單純采用乙醇多次沉澱、乙醚和(hé)外通丙酮類有機溶劑洗滌等措施均能夠顯著提高其純度,而活性碳、喝通高嶺土(tǔ)等介質吸附操作效果較差。但單獨所使用複合溶劑洗滌沉澱法,有機溶人妹劑消耗量大,成本較高,進一步提高純度要依靠層析技術(shù)、酶法精制業爸或特殊化學處理手段來實現。
白芨鱗莖多糖直接使用時感官不良,一般提取工藝僅能夠生産75%左右的粗多跳數糖,因帶有較為典型的藥味,且顔色偏深,在食品加工中(那店zhōng)受到限制,提高白芨葡甘聚糖的藍明純度能夠較好地解決上述問(wèn)題,但因白芨多糖膠溶行如液粘度大,且色素、多酚、蛋白等雜質與多糖呈鍵合狀态,一般精制手段難以實白信現。粗白芨多糖在脫水幹燥後,溶解性能降低,尤其是采用醇沉澱-幹燥工藝銀他,速溶問(wèn)題是一個(gè)很大的子工缺陷。其原因除了上面提高的雜質高外,還與多糖膠較高的分子(zǐ)量有關(又劇guān)。
發明内容
該發明的目的是提供一種生物酶法精制和(hé)溶街些劑處理相結合的白芨多糖膠精制純化工藝。
該發明技術(shù)方案的理論基礎:(1)側鍊基團對雜質的纏繞作用較大,司南通(tōng)過蛋白酶進行修建;(2)蛋白酶可(kě)以起到部分脫除糖蛋黑森白作用,在去除蛋白基團的同時,也使結合到蛋白上的部分雜質予以去除; 可還(3)通(tōng)過複合溶劑處理,使脂類、色素類成分予以清除。課題的得物技術(shù)難點是酶法修剪,體現在酶的篩選、條件優南窗化。
未經處理的白芨多糖,分子(zǐ)量可(kě)達到200萬以上,多車其溶解需要充分的溶漲後才能較為徹底。該發明通(t家中ōng)過對白芨多糖分子(zǐ)的适度降解,來話舊提高溶解性能,其适度降解作用主要體現在2個(g制影è)方面,一是對蒂合大分子(zǐ)進行酶法剪切,切除都相分子(zǐ)間聯接的蛋白,二是對主鍊進行調整。在此基們都礎上,結合溶劑的分步沉澱獲得組分相對均一的多糖組分,提高産品的速溶機答性能,拓寬應用範圍。
白芨膠的主要成分為多糖(特别是葡萄甘露聚糖),故如子該發明所稱白芨多糖膠、白芨多糖、白芨葡甘聚現山糖均可(kě)代表白芨膠。
該發明的目的是通(tōng)過下(xià)列技術(shù)措施實現的:見內
白芨多糖膠精制工藝,該工藝包括下(xià)列步驟:從技
a.白芨粗多糖加入60-70%乙醇65-75℃討有洗滌,冷(lěng)卻,過濾,95-98%小火乙醇洗滌三次,真空抽濾;
b.按25-30ml水/g洗滌後的衡幹重白芨粗多糖的比例加入水複溶;
c.加入蛋白酶,根據蛋白酶适宜pH及溫度條件下(xià)酶解15-25h房舊;
d.滅酶,離(lí)心,收集上清液,加入3-5倍上清液體積的乙醇,醇沉3玩窗-5h;
e.洗滌,95-98%乙醇洗滌2-3次,丙酮洗滌2-3次,乙醚不北洗滌2-3次,真空抽濾;
f.烘幹,貯存。
所述白芨多糖膠精制工藝,其步驟a中(zhōng)白芨粗短都多糖與60-70%乙醇比例按重量體積比(g/ml)為 1:3-5。
所述白芨多糖膠精制工藝,其中(zhōng)蛋白酶為木瓜蛋白酶、堿性蛋冷少白酶、中(zhōng)性蛋白酶、複合蛋白酶中(zhōn風跳g)的一種或多種。
所述白芨多糖膠精制工藝,其步驟c中(zhōng)加入的乙醇濃度為95-9冷煙8%。
工藝過程詳述如(rú)下(xià):
白芨粗多糖預處理:白芨粗多糖顔色較深,具有典型的中(zhōn銀裡g)藥味,其中(zhōng)含有還原糖、蛋白質、色素等雜質,所以需要錢她對連續逆流提取的白芨多糖用熱醇洗滌以初步脫色除雜。稱取白芨粗提物,按物料重空說量體積比1:3-5加入濃度為70%的乙醇溶液(例:白高服芨多糖膠100g,70%乙醇300-500ml,下(xià)同),設定水輛志浴溫度至70℃,加熱0.5-1.5h,冷(lěng)卻,真空抽濾章多,用濃度為95%的乙醇洗滌三次。
白芨多糖的複溶:白芨粗多糖膠液粘度大,低厭溶解性不佳,工業(yè)生産上需要确定其最報下佳溶劑用量,以節約成本。本實驗選擇溶劑水加入量梯度分别為10ml,20ml,3得在0ml/g衡幹重白芨粗多糖。10ml水加入量的水成白芨溶液粘度偏大,比較頻短粘稠,轉移困難。20ml水成溶液粘度适中(zhōng),30ml溶液比下拿較稀,成水狀,可(kě)随意轉移,綜合考慮白芨膠溶液玩用的溶解特性,選取25-30ml溶劑水/g洗滌後的衡幹重白在場芨粗多糖。
最佳酶解工藝的确定:大多多糖的提取是以作男水溶液為主,加入酸、堿、鹽或者酶等物質,加入乙醇、季铵鹽等陽離(lí)子(章電zǐ)表面活性劑,使多糖沉澱出來。由于白芨粗多糖中(zhōng)主要雜質為蛋白遠話質,通(tōng)常除蛋白的方法有:酶解法、sevag法,三氯乙酸法、鹽酸法美用。再經透析除去小分子(zǐ),達到基本純化的目的。
目前的分級方法有:1.沉澱法包括乙醇沉澱,含鹽溶液沉澱還鄉法,季铵鹽沉澱法;2.電泳法;3.離(lí)子(zǐ愛慢)交換,凝膠過濾。考慮到白芨葡甘聚糖膠作為藥食兼用的添加劑的得廠産品應具有安全性高的特點,及保持并提高其樂照高粘度的理化特性,本發明選擇溫和(hé)的酶法工藝進行蛋白脫除。
蛋白酶水解:把白芨多糖膠置于200ml錐形瓶中(zhōng),按30ml/人能g幹重加入溶劑水,不斷攪拌,使之溶解,待雜分其完全溶解後,分别參照各酶的最佳作用條件,月南設定水浴鍋溫度,并調整pH到最佳作用範圍内。從加入蛋窗子白酶開始計時,酶解15-25h。
離(lí)心醇沉:蛋白酶水解後的白芨膠水成液,在水浴中(zhōn從問g)70-80℃滅酶10min,用高速冷(l黑市ěng)凍離(lí)心機6000r/min,離(lí)心15min。傾市線出上清液,加入3-5倍上清液體積的95%乙醇攪拌,醇沉4h。
真空抽濾:真空抽濾後的白芨膠用95%的乙醇洗滌2次,路新丙酮洗滌3次,乙醚洗滌3次,濾幹。
烘幹貯存:濾幹後的白芨膠其内含有一定的水分,為便作厭于保存期間,需要在烘箱中(zhōng)進行幹燥處理。設定烘箱溫度一跳為60℃,烘2h。
該發明的有益效果:
處理後白芨葡甘聚糖的粘度基本上不受影響,具有相當高的粘度。準确稱取幹重商玩為4g的白芨葡甘聚糖溶于200mL的蒸餾水中(zhōng)配制濃度為2%白身北芨葡甘聚糖溶液。用内徑為1mm毛細管粘度計,兩次測定的時風要間分别為4min22sec85,4min光腦19sec52。粘度平均值為17.55mm2/s。
該法制得的産品純度高,有良好的溶解性能成膜性能優于羧甲基老校纖維素鈉和(hé)聚乙烯醇,在食品添加劑工業(yè)上是一種優良的在近天然增稠劑、乳化劑和(hé)穩定劑。溶解性能好,解答鐘決白芨粗多糖直接使用溶解性不佳現象,提高子村了增溶性能,拓寬了産品應用範圍,可(kě)以形成高濃度、低粘度型膠液,有突女裡出的抗鹽和(hé)抗酸性能,受pH、無機離(lí)子(z能國ǐ)、溫度等因素影響較少(shǎo),适合工腦複雜組成的食品加工;具有多重功能和(hé)良好的複配特員水性;安全性高,生物相容性好。用酶量小,原料易得,價格低白做廉,為白芨膠的生物化學方法精制純化找到了一條商(shāng)業(yè鐘子)化的的新途徑,對于白芨膠的深度純化加工以及大規模工業(yè)化生産兒計,拓展其作為特色資(zī)源在現代食品加工及醫藥領域的應用範圍具有極為雨綠深遠(yuǎn)的意義。