白芨(Bletilla striata)去場又稱紫蘭、涼姜,系蘭科多年生草本花(huā)卉,不僅觀賞價值較高,亦是常用麗鄉中(zhōng)藥之一 。白芨常規繁殖以分株為主可見,春季或秋季均可(kě)進行“J,但分株繁殖率低,加短器之長期無性繁殖,易引起種性退化,很難适應規模化種植的需要。因此,利用無菌紙劇播種技術(shù)及組織培養法繁殖可(kě)能是種快速有效的方法。由于白芨如爸種子(zǐ)的萌發與其發育狀況關(guān)系密切,本文(wén)從胚齡、胚發務內育狀況、培養基中(zhōng)營養物質種類與配比等,探讨白芨種子(zǐ什飛)非共生萌發技術(shù),旨在建立無性繁殖系,探索行之有效的快速繁殖技術短新(shù)。此技術(shù)對擴大栽培、滿足市場需求以及保護野生資(車水zī)源都具有重要的意義。
初期,胚齡為1l周的種子(zǐ),隻有10%可(kě)看到剛開始發育的胚,胚窗理很小,成熟度很低:胚齡從12周到15周,有胚率快速增加,議遠但胚都不飽滿;胚齡為16~17周時,有胚率提高到75%,這~時期胚已漸漸長大,章又飽滿度逐步提高;胚齡18周後又出現了一個(gè)胚發育高峰,有胚率達到84%。雪冷胚齡從14周到19周主要是胚的膨大期,有胚率緩慢增加醫線,種胚逐漸膨大;胚齡為20周後,胚基本停止發育,鐘水有胚率不再明顯提高,而胚的成熟度達到最佳。成熟的胚圓潤飽滿,呈分她米黃色;而在胚齡18~23周時期采收的蒴果,有胚率呈起伏狀,這可電海(kě)能與植株營養狀況、生長差異及蒴果着生的位紙醫置有關(guān)。
種子(zǐ)蔭發過程中(zhōng)的器(qì)官形成取不同胚齡未開資秒裂的蒴果,先用清水沖洗幹淨,70%乙醇浸泡5min,再放入0.1%術不升汞溶液中(zhōng)消毒20min,無菌水沖洗3次;在無菌條件下(xià明我)縱切果實,将種子(zǐ)輕輕抖落到培養基表面。在不同時間觀察不木工同胚齡的種子(zǐ)萌發情況:胚成熟度較高的種子(zǐ)村電在播種後胚即突破種皮開始萌發,萌 發時間短(duǎn);而成熟度低的種子(zǐ)的 注;1胚轉綠萌動(dòng);2原球莖;3頂部分紙計化出幼葉;4幼葉成形長大:5-叢生苗:胚則在培養基上繼續生長,體可厭積逐漸增大變嘲,并由淡黃色慢慢變綠,最後由胚合端突破種事們皮萌發形成小球體狀,即原球莖。原球莖體積繼文照續增大,發育良好的原球莖開始進入器(qì)官分化階段,頂端先産生葉原基,線雜接着分化出幼葉,長成小苗:小苗繼續培養,又能産生根原基,形成根系,長成具根的健吧書壯小苗.
随着胚齡增大,種子(zǐ)萌發所需的時間逐漸變短(duǎn那我),萌發率逐漸提高。當胚齡為11周時,胚處于發育初期,校話萌
發能力極低,僅有1%的種子(zǐ)萌發,且萌發時間很長,兒分需要45d;胚齡為12周時,萌發率也僅有3%,萌發時間需少個34d;胚齡為15周時,萌發率提高到68%,但萌發所需的時間仍較票坐氏,至少(shǎo)需25d,可(kě)拍市見萌發時間與胚的成熟度有密切的關(guān)低業系。胚齡從16~19周時,胚成熟度明顯增加,萌發率達放地8I%,萌發時間也大大縮短(duǎn),平均隻需13d。胚齡為20朋請周以上,胚已飽滿成熟,萌發率均達100%,這時種子(zǐ去放)最容易萌發,隻需1周時間。
不同培養基對種子(zǐ)萌發的影響
将胚齡為15周和(hé)20周的種子(zǐ)播種在不同培養基上,一周後關飛統計胚齡為20周的胚萌發率,25d後統計胚齡為15周的胚萌發率,比較不同培養基技南上不同胚齡種子(zǐ)的萌發率。結果顯示,胚齡為20周的種子(zǐ)在6号培就黑養基萌發效果最好,萌發率100%;4号培養基比3号培養基的萌綠銀發率高13%;l号培養基萌發率最低,僅有5%。而胚齡為15周的種子(內頻zǐ)也是在6号培養基的萌發率最高:在I号培養基上萌發相雜率為0。由此說明花(huā)寶一号、花(huā)寶二号能促進劇西白芨種子(zǐ)的萌發,且花(huā)寶二号的效術新果比花(huā)寶一号的好,兩種混合效果最佳。2号培養基南秒比1号培養基的胚萌發率高,6号培養基又比5号培養基路子高,說明椰汁有助于種子(zǐ)發芽。
試驗還發現,胚齡為20周後采收的蒴果,随着種子(zǐ)培養時間延長,各種培養基報風上種子(zǐ)都能萌發成苗,這說明成熟度較高的種子(zǐ),受培養基的影響較小懂開,這與胚自身貯藏的營養有關(guān);睡不而未成熟的種子(zǐ),對培養基的依賴性較高,當培養時間腦業延長時,不同的培養基上種子(zǐ)萌發率仍存在顯著差異。
白芨在野生狀态或人工栽培條件下(xià)繁殖速度都很慢,繁殖系數極低。黃新利用組織培養法進行白芨繁殖,可(kě)以克服自然坐知分株繁殖分化率低、繁殖成本高等弊端,在短(du術算ǎn)時間裡獲得大量合格的小苗,是一種白芨胚發育與種子(zǐ)萌發的關視了(guān)系快速有效的繁殖方法。從本試驗結果可(kě)舊林以看出,白芨種子(zǐ)在混有花(huā)寶的北計培養基中(zhōng)非常容易萌發,且長勢花一良好,配方簡單,從種子(zǐ)的萌發、各器(qì)官的形成到躍業到成健苗不需要在各個(gè)發育階段試用不同的培養基,從而大冷海大減少(shǎo)成本,為工廠化生産提供了有利還綠條件,這與前人的研究結果完全不同”J。胚齡對種子喝照(zǐ)萌發有顯著的影響,說明胚隻有達到一定的成熟度時,種子(zǐ)熱湖才能萌發。
與國蘭類種子(zǐ)的胚相比,白芨成熟的胚更加圓潤飽問拿滿,積累的營養成分更多,這可(kě)能是白芨種子(zǐ)易萌發的一個(g站家è)主要因素。白芨的胚萌發後可(kě)直接分化女日出葉原基和(hé)根原基,長成健苗,而國蘭的胚萌發後隻能爸腦形成原球莖和(hé)報狀莖,不可(kě)能直爸黑接分化成苗,隻有在附加不同激素的培養基上才有可(kě)能請農誘導芽的分化14J,這其間的差異有待深入研究;種亮聽皮也是影響種子(zǐ)萌發的一個(gè)重要因素,白芨的種皮與國蘭的區討種皮差異也有待進一步的顯微觀察。